Hallo
ich habe bald meine Masterprüfung und soll u.a. das Verfahren erklären, wie knockout-Mäuse hergestellt werden. Da ich bis jetzt nur mit Bakterien gearbeitet habe, habe ich versucht im Internet und einigen Büchern was zu finden...Daraus werde ich aber nicht schlau. Wenn ich das richtig verstanden habe werden embryonale Stammzellen aus einer Blastocyste entnommen, denen ein Vektor eingesetzt wird. Über homologe Bereiche wird dann ein Antibiotikarasistenzgen in das Mausgenom eingebracht. Dazu wird eine Neomycinresistenz verwendet, die auch als Selektionsmarker dient, um erfolgreich transfizierte embryonale Stammzellen herauszufinden. So weit ich weiß, ist bindet Neomycin an die 30s UE der Ribosomen von Bakterien...die sind doch nicht in einer Mauszelle vorhanden...Oder hab ich das alles falschverstanden? Gibt es sonst noch was wichtiges, was ich wissen sollte? Vielen Dank schon mal für die Hilfe!
ich habe bald meine Masterprüfung und soll u.a. das Verfahren erklären, wie knockout-Mäuse hergestellt werden. Da ich bis jetzt nur mit Bakterien gearbeitet habe, habe ich versucht im Internet und einigen Büchern was zu finden...Daraus werde ich aber nicht schlau. Wenn ich das richtig verstanden habe werden embryonale Stammzellen aus einer Blastocyste entnommen, denen ein Vektor eingesetzt wird. Über homologe Bereiche wird dann ein Antibiotikarasistenzgen in das Mausgenom eingebracht. Dazu wird eine Neomycinresistenz verwendet, die auch als Selektionsmarker dient, um erfolgreich transfizierte embryonale Stammzellen herauszufinden. So weit ich weiß, ist bindet Neomycin an die 30s UE der Ribosomen von Bakterien...die sind doch nicht in einer Mauszelle vorhanden...Oder hab ich das alles falschverstanden? Gibt es sonst noch was wichtiges, was ich wissen sollte? Vielen Dank schon mal für die Hilfe!