Mareeenchen
Einfacher Mehrzeller
Hallo ihr Lieben,
In meiner Bachelorarbeit schreibe ich über konjugativen Plasmidtransfer in Gram-positiven Bakterien anhand des Plasmids pIP501. Ein Teil der Arbeit soll ein Versuchsaufbau werden bei welchem die tra-Regionen von pIP501 und dem Ti-Plasmid aus Agrobacterium tumefacien verglichen werden. Dazu müsste ich ja eine DNA-Sequenzierung durchführen, welche ich dann am PC auswerten kann. Es geht nur darum einen theoretischen Aufbau zu kreieren, ich kann leider nicht ins Labor wegen Covid. Meine Frage ist nun: Wie schaffe ich es denn, dass die DNA genau da geschnitten wird, wo die Tra-Regionen sich befinden? Geht das mit Enzymen, wenn ja wie usw? Ihr seht, ich bin leider überfordert. Meine Professorin meinte, dass es nicht mit Restriktionsenzymen gemacht wird sondern durch einen DNA-Sequenzvergleich der Plasmide am Computer. Verglichen werden dort die kodierten Tra-Gene. Leider verstehe ich nicht ganz genau was Sie meint. Könnt ihr mir helfen?
In meiner Bachelorarbeit schreibe ich über konjugativen Plasmidtransfer in Gram-positiven Bakterien anhand des Plasmids pIP501. Ein Teil der Arbeit soll ein Versuchsaufbau werden bei welchem die tra-Regionen von pIP501 und dem Ti-Plasmid aus Agrobacterium tumefacien verglichen werden. Dazu müsste ich ja eine DNA-Sequenzierung durchführen, welche ich dann am PC auswerten kann. Es geht nur darum einen theoretischen Aufbau zu kreieren, ich kann leider nicht ins Labor wegen Covid. Meine Frage ist nun: Wie schaffe ich es denn, dass die DNA genau da geschnitten wird, wo die Tra-Regionen sich befinden? Geht das mit Enzymen, wenn ja wie usw? Ihr seht, ich bin leider überfordert. Meine Professorin meinte, dass es nicht mit Restriktionsenzymen gemacht wird sondern durch einen DNA-Sequenzvergleich der Plasmide am Computer. Verglichen werden dort die kodierten Tra-Gene. Leider verstehe ich nicht ganz genau was Sie meint. Könnt ihr mir helfen?